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豬藍耳病TJM-F92株對豬瘟C株沒有免疫抑制?

 

 

  PRRSV引起豬只產生哪些病變?

  1、藍耳病的六大癥狀:①母豬繁殖障礙:弱仔、流產、早產、死胎、木乃伊(圖1);②母豬不發情、發情混亂、不孕不育;③保育豬毛松毛長、高度沉郁;④嚴重的呼吸道癥狀、喘氣、腹瀉;⑤母豬和各階段豬出現神經癥狀、共濟失調;⑥常與副豬嗜血、喘氣病等混合感染,高致病性藍耳病導致母豬和大豬死亡。

  圖1 患病母豬流產

  2、病理變化:患病仔豬出現典型的PRRS病變,肺臟出血嚴重,水腫、實變(圖2-A,B)。腎臟皮質部和髓質部出血嚴重(圖2-C)。扁桃體出血,紅腫(圖2-D)。脾臟輕度腫大、邊緣呈鋸齒突起,有出血點,個別有小的梗死灶。肝臟邊緣呈暗紅色,出血嚴重。其他病變包括小腸出現卡他性炎癥、出血,腦輕度充血,全身性的淋巴結腫大、出血(和顏良,2011)。

 

  圖2 患藍耳病豬只解剖病理變化

  CSFV引起豬只產生哪些病變?

  1、CSFV可引起豬的高熱稽留、全身廣泛性出血(圖3)及母豬繁殖障礙等一系列癥狀(Moenning, 2000)。其特征是:急性呈敗血性變化,實質器官出血,壞死和梗死;慢性呈纖維素性壞死性腸炎,后期常有副傷寒及巴氏桿菌病繼發。

 

  圖3 患病豬只全身廣泛性出血

  2、病理變化:受CSFV感染仔豬的各臟器均出現了不同程度的病變。肺部以不同程度的出血、實變、水腫為主(圖4-A、B)。腎臟包膜下有暗紫紅色小點狀出血,腎皮質和髓質均有出血(圖4-C);扁桃體出血,壞死,部分地方出現潰爛(圖4-D)。淋巴結腫脹,外觀呈深紅色,被膜暗紅的并有出血點;脾臟邊緣出現壞死性病灶(和顏良,2011)。

  

  圖4 患豬瘟豬只解剖病理變化

  然而,有研究表明,PRRSV感染后能夠抑制機體對其他病原的免疫反應。PRRSV感染可明顯抑制豬瘟疫苗的免疫應答(Li and Yang, 2003; Suradhat et al., 2006)。更有研究發現,如果在豬瘟疫苗免疫前一周給豬接種PRRSV,會顯著抑制CSF抗體的產生(Suradhat et al., 2006)。因此,研制出一種安全、有效且對其它病原沒有干擾的PRRSV疫苗尤為重要。

  基于此,中國農業科學院武華博士課題組進行了PRRSV TJM-F92毒株對豬瘟病毒(CSFV)C株是否存在免疫干擾作用的研究。

  為什么選擇TJM-F92毒株?

  武華博士課題組自2006年至2010年從我國北方部分省市采集疑似高熱病的病死豬病料,在Marc-145細胞上進行病毒分離,共分離到6株病毒,經鑒定均為美洲型PRRSV,與JXA1和HUN4等HP-PRRSV株全長及各片段長度完全一致,且在NSP區段第481位及533~561位均出現不連續30個氨基酸的缺失。通過對傳代致弱過程中不同代次的病毒進行全基因序列分析,結果顯示,我們將PRRSV TJ株在Marc-145上連續傳代弱化,每隔5~10代進行蝕斑克隆純化至F19時,篩選到一株在NSP基因上除存在不連續30個氨基酸缺失的同時還存在一段連續缺失120個氨基酸的毒株(圖5)。在進行PRRSV活疫苗研制過程中,通過蝕斑克隆純化篩選獲得的一株致弱毒株并傳代后,即PRRSV TJM-F92株。該毒株與同期研制的其它HP-PRRSV活疫苗相比,具有病毒血癥持續時間短,病毒血癥載毒量低,散毒能力差,同居不易感染,無毒力返強趨勢,安全性優良,同時具有優良的保護效力等特點。

 

  圖5 TJM-F92相較HP毒株有360個核苷酸自然缺失

  TJM-F92毒株是否存在免疫抑制?

  在進行PRRSV TJM-F92株活疫苗研制過程中,課題組進行了PRRSV TJM-F92株對CSFV C株免疫干擾研究的預試驗,結果初步表明,PRRSV TJM-F92株與CSFV C株同時免疫,前者對后者無免疫抑制作用。

  隨后又開展了單劑量PRRSV TJM-F92株對單劑量CSFV C株的免疫干擾研究,分別從體液免疫、細胞免疫、免疫攻毒、病理變化等方面進行了詳細研究。結果表明,PRRSV TJM-F92株與CSFV C株二聯免疫組仔豬在抗體水平、白細胞數量變化以及T細胞亞群含量等方面與兩個單苗免疫組無明顯差異,說明免疫期間,PRRSV TJM-F92株沒有影響CSFV C株的免疫應答。免疫28天后攻擊PRRSV TJ株強毒結果表明,二聯免疫組與PRRSV TJMF92株單獨免疫組仔豬,均未出現PRRS典型臨床癥狀,兩組免疫組在抗體水平、白細胞數量、T細胞亞群比例等方面均無明顯差異。PRRSV陰性對照組仔豬的白細胞數量與免疫組仔豬白細胞數量相比明顯下降,差異顯著。

  攻毒后免疫組仔豬完全保護,PRRSV陰性對照組仔豬死亡率達80%。攻擊CSFV石門系血毒結果表明,二聯免疫組與CSFV C株單獨免疫組仔豬,均未出現CSF典型的臨床癥狀,兩組試驗動物在抗體水平、白細胞數量、T細胞亞群比例變化方面無明顯差異。CSFV陰性對照動物均出現了CSF典型的臨床癥狀,死亡率高達100%,陰性對照組仔豬CD3+和CD4+T細胞亞群的數量在感染過程中均出現了明顯的降低。該研究結果表明,同時免疫PRRSV TJM-F92株疫苗株與CSFV C株疫苗株,PRRSV TJM-F92株不會抑制機體對CSFV C株的免疫應答,試驗同時表明,CSFV C株也不干擾PRRSV TJM-F92株疫苗的免疫效果(和彥良,2011)。

  本研究還設計應用高劑量PRRSV TJM-F92株(106.0TCID50)對低劑量CSFV C株(101.0FAID50)的免疫干擾研究,其中PRRSV TJM-F92株使用的劑量為10倍使用劑量(106.0TCID50),CSFV C株使用劑量僅為101.0FAID50,相當于CSFV C株最小免疫劑量,并同時設計CSFV C株低劑量免疫對照組和CSFV C株陰性對照組,分別從體液免疫、免疫攻毒保護及病理學變化等方面進一步評價PRRSV TJM-F92株對CSFVC株是否存在免疫干擾作用。試驗結果表明,高劑量PRRSV TJM-F92株與低劑量CSFV C株免疫組在體液免疫、攻毒保護與病理學變化等方面與低劑量CSFV C株免疫組均無顯著差異。

  總而言之,應用傳統方法制備的PRRSV活疫苗,很難改變PRRSV的免疫抑制性。臨床上通過將PRRSV活疫苗與其它活疫苗進行間隔免疫來降低PRRSV活苗對其它活疫苗的免疫干擾。然而,值得一提的是,武華博士課題組經過大量試驗證明,PRRSV TJM-F92株是一株安全有效的疫苗株,與CSFV C株活疫苗同時免疫,對CSFV C株無免疫干擾作用。

[責任編輯:豬小妹 ]
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豬藍耳病,免疫抑制,豬瘟C株,豬藍耳病TJM-F92株

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